摘要:随着水产养殖业的发展,水产养殖动物病害频发,目前亟需一种灵敏、快速、准确的病原微生物检测方法。该研究采用生物免疫荧光技术,通过不同颜色的量子点(QDs)标记副溶血弧菌抗体(Ab1)和迟缓爱德华氏菌抗体(Ab2)来实现多种病原菌的同时检测。结果显示,QDs-Ab的荧光通过加入氧化石墨烯(GO)产生淬灭,构建了捕获目标细菌的探针,氧化石墨烯最适淬灭浓度为60 ng/ml。细菌捕获探针中加入副溶血弧菌或迟缓爱德华氏菌后,能够检测到重新恢复强度的绿色或橙色荧光。副溶血弧菌和迟缓爱德华氏菌的检出限分别为1.5×10^4 CFU/ml和2.1×10^4 CFU/ml。针对副溶血弧菌和迟缓爱德华氏菌设计的生物免疫传感器的特异性,选取灿烂弧菌、溶藻胶弧菌和嗜水气单胞菌作为对照,结果显示,对照组不能明显引起荧光强度的改变,而试验组却能显著提高荧光强度。该研究建立的基于荧光能量共振转移(FRET)的具有高灵敏度和特异性的生物传感器检测方法在细菌的早期诊断中有良好的应用潜质。
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